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大規(guī)模細胞培養(yǎng)技術(shù)是指在人工條件下(設(shè)定ph、溫度、溶氧等),在細胞生物反應(yīng)器中高密度大量培養(yǎng)動物細胞用于生產(chǎn)生物制品的技術(shù)。目前可大規(guī)模培養(yǎng)的動物細胞已成功生產(chǎn)了包括狂犬病疫苗、口蹄疫疫苗、甲型肝炎疫苗、乙型肝炎疫苗、紅細胞生成素、單克隆抗體等產(chǎn)品。該技術(shù)經(jīng)有了很大發(fā)展,從使用轉(zhuǎn)瓶(rollerbottle)、CellCube等貼壁細胞培養(yǎng),發(fā)展為生物反應(yīng)器進行大規(guī)模細胞培養(yǎng)。
一種細胞大規(guī)模培養(yǎng)技術(shù)——細胞工廠,在疫苗行業(yè)已逐漸普及。這項技術(shù)擁有能降低污染風(fēng)險,節(jié)省空間,表面有利于細胞貼附和生長,能較好的替代傳統(tǒng)轉(zhuǎn)瓶培養(yǎng)技術(shù)的優(yōu)點,一定程度上彌補了之前技術(shù)的問題。
當(dāng)然如何通過細胞工廠保持每一次操作的安全、一致、無污染,是需要重點考慮的問題。那么我們應(yīng)該如何正確的操作細胞工廠呢?接下來,康寧3D細胞培養(yǎng)技術(shù)小編帶大家了解具體的操作流程。
由于細胞工廠的培養(yǎng)特性,放大的最簡單方式就是增加細胞工廠的數(shù)量。當(dāng)細胞工廠數(shù)量增多時,我們就會遇到與使用細胞瓶培養(yǎng)時一樣的麻煩——多次的開蓋操作。隨著開蓋次數(shù)的增加,操作的時間會延長,污染的風(fēng)險也會隨之增高。為了解決這個問題,就可以用到一個很簡單的方式,將細胞工廠從單個的單位組成一組,并且將開放的培養(yǎng)組件組合成一個密閉的系統(tǒng)。
1.準備定制傳液蓋、培養(yǎng)基、細胞工廠、連接管路。
2.將傳液蓋與培養(yǎng)基瓶、細胞工廠與連接管路在A級環(huán)境下連接。
3.將傳液蓋與連接管路通過快接口連接,組成封閉系統(tǒng)。
4.進行傳液操作,傳液結(jié)束后,連接管路可以保留在細胞工廠上進行培養(yǎng),以及供下一步的換液與傳代操作使用。
1.變開放系統(tǒng)為密閉系統(tǒng),降低污染風(fēng)險
相信大家也組裝過簡單的管路用于培養(yǎng)基及其他緩沖液的傳輸,使用管路操作最顯著的優(yōu)點就是將細胞工廠的開放操作變?yōu)榱嗣荛]操作。培養(yǎng)基不在經(jīng)過開放的環(huán)境,這樣就能大大降低外界污染的風(fēng)險,培養(yǎng)基瓶也可以通過定制的傳液蓋,在超凈臺中組裝后與管路系統(tǒng)連接,實現(xiàn)密閉的傳液。
在使用單個管路連接細胞工廠時,過高的進液速度會導(dǎo)致細胞工廠的承受的壓力增加,導(dǎo)致細胞工廠出現(xiàn)異響或者炸裂。這些壓力是由于快速的液體流入,氣體無法順利排出導(dǎo)致的。一般來說,單個細胞工廠在不使用濾器改善通氣條件的情況下。目前大家推薦的進液速度為3-4L/min。這樣當(dāng)大家使用管路將多個細胞工廠串聯(lián)的時候,由于多個細胞工廠可以分擔(dān)氣體排出的壓力,進液速度可以成倍增加,4個細胞工廠串聯(lián)可以做到10-12/min的進液速度。這時進液就不再是操作的瓶頸了。
常規(guī)的由小試向中試階段過渡的操作可能在超凈臺中進行。在大生產(chǎn)的車間中,大家可能使用溫室,定制的架子,或使用自動化設(shè)備進行操作。無論使用哪種布局方式,或者一次連接幾個細胞工廠,目前的技術(shù)都可以根據(jù)需求,定制不同的連接方案,與不同的工藝緊密契合。
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標(biāo)題:大規(guī)模細胞培養(yǎng)應(yīng)該如何高效進行?
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